Điệp Viên 007 phần 6 có tựa là Điệp Vụ Nữ Hoàng, đây là phần phim có sự thay đổi đáng kể khi đạo diễn Peter R. Hunt và nam chính George Lazenby đều có lần đầu tiên tham gia vào seri này, đó cũng là một phần khiến Điệp Vụ Nữ Hoàng không được đón nhận tích cực như các phần trước, doanh thu khiêm tốn nhất từ phần đầu tiên.
Trong Điệp Viên 007: Điệp Vụ Nữ Hoàng, Điệp viên Anh James Bond 007 (George Lazenby) nhận được một kỳ nghỉ phép sau khi hoàn thành những nhiệm vụ quan trọng trong phần trước. Khi đang đi nghỉ, anh đã ngăn một phụ nữ trẻ tên là Teresa “Tracy” Draco (Dame Diana Rigg), tự sát. Cha của cô gái này là Marc-Ange Draco (Gabriele Ferzetti), người đứng đầu một tổ chức tội phạm quy mô lớn, người bị Bond để mắt và muốn anh ta bảo vệ con gái của mình bằng cách kết hôn với cô ấy.
Đổi lại, ông ta cung cấp thông tin Bond sẽ dẫn ông đến kẻ thù không đội trời chung Ernst Stavro Blofeld (Telly Savalas). Lúc đầu, Bond đồng ý hoàn toàn thỏa thuận để hoàn thành mục tiêu giết Blofeld, nhưng sau đó anh ta dần yêu Tracy. Nhưng khi người Anh biết được Blofeld có kế hoạch tiêu diệt loài người bằng một loại virus chết người, 007 bị giằng xé giữa lòng trung thành với đất nước của mình và ý định kết hôn với Tracy….